东南亚缺失型α-地中海血虚Zeta链卵白
检测试剂盒（酶联免疫法）说明书
【产品名称】
通用名称：东南亚缺失型α-地中海血虚Zeta链卵白检测试剂盒（酶联免疫法）
【包装规格】
96人份/盒，，，，48人份/盒。。
【预期用途】
本试剂盒用于体外定性检测人血液中Zeta链卵白。。
本试剂盒适用于0.5岁以上人群的东南亚缺失型α-地中海血虚的辅助诊断。。
地中海血虚（Thalassemia）是由于常染色体遗传性缺陷，，，，引起珠卵白链合成障碍，，，，一种或几种珠卵白数目缺乏或完全缺乏，，，，正常血红卵白不可形成，，，，使红细胞易被破损，，，，寿命缩短的溶血性血虚。。地中海血虚基因型和体现型均多样化，，，，差别很大，，，，凭证缺失爆发的基因差别，，，，分为α与β地中海血虚。。
α地中海血虚中的东南亚缺失型(--SEA)地中海血虚基因携带者在东南亚及我国南方漫衍最为普遍，，，，是造成潜在危害的主要类型。。由于虽然(--SEA)地贫基因携带者大部分无显着症状，，，，但双方同为携带者的婚配子代就会有泛起Bart’s水肿胎和Hb H病的可能性，，，，给家庭和社会带来极重肩负。。
已知血红卵白Zeta链保存于正凡人的胎儿期，，，，出生后3个月即不可检出，，，，但东南亚缺失型α-地中海血虚基因携带者的血液中终生涯在Zeta链。。因此，，，，Zeta链可作为辅助诊断东南亚缺失型α-地中海血虚的标记卵白。。
【磨练原理】
双抗体夹心ELISA原理：用纯化的抗Zeta链单克隆抗体包被微孔板，，，，加入裂解的待检血液，，，，样品中保存的Zeta链可与包被抗体形成抗原抗体复合物，，，，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗Zeta链差别表位的单克隆抗体，，，，形成抗体－抗原－二抗酶标记物免疫复合物。。洗板，，，，除去多余的连系物，，，，加入显色液，，，，爆发有颜色产品，，，，用酶标仪测定显色反映，，，，凭证显色反映的强度举行效果的定性判断。。
【主要组成因素】
1. 本试剂盒包括的组份
 组份名称 主要因素 使用要领 装量
    96人份／盒 48人份／盒
1 单抗Zeta链包被板 微孔板中预包被抗Zeta链单克隆抗体（泉源于小鼠） 可拆成单孔，，，，直接使用 96孔 48孔
2 单抗Zeta链酶标记物 辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗Zeta链单克隆抗体（泉源于小鼠）；；硼酸盐缓冲液，，，，含0.1% Proclin-300、0.002%苯酚红、卵白稳固剂。。 直接使用 6mL×2瓶 6mL×1瓶
3 Zeta链卵白阳性比照 α-地中海血虚基因携带者血液，，，，含40%甘油与0.02%硫柳汞。。 取25l加入至200μL样品裂解液中，，，，强烈振荡60秒使红细胞完全裂解。。 0.5mL×1支 0.5mL×1支
4 Zeta链卵白阴性比照 正凡人血液，，，，含40%甘油与0.02%硫柳汞。。 取25l加入至200μL样品裂解液中，，，，强烈振荡60秒使红细胞完全裂解。。 0.5mL×1支 0.5mL×1支
5 Zeta链卵白临界比照 重组Zeta链卵白，，，，40ng/mL；；硼酸盐缓冲液，，，，含40%甘油、0.2%硫柳汞、卵白稳固剂。。 直接使用 1.5mL×1支 1.5mL×1支
6 显色液A 含柠檬酸、过氧化氢 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 显色液B 含柠檬酸、四甲基联苯胺（TMB） 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 浓缩洗涤液（10倍） 磷酸盐缓冲液，，，，含Tween-20，，，，10倍浓缩 用蒸馏水或去离子水10倍稀释后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 样品裂解液 含0.83%氯化铵 直接使用 30mL×1瓶 30mL×1瓶
10 终止液 0.5 mol/L H2SO4溶液 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋  用于密封板条 1个 1个
12 封板膜  用于密封板条 4片 4片
13 纪录纸  用于试验纪录 1份 1份
注：只有所有使用本公司试剂才华包管检测效果，，，，不可混用其它制造商的产品；；差别批号的组份不得混用。。
2. 需要但未提供的质料：
蒸馏水或去离子水
微孔板洗濯器
10μL～100μL、1mL移液器与一次性吸嘴
37℃恒温装备
微孔振荡器
60分钟或更长时程的计时器
【贮存条件及有用期】
于2℃～8℃避光生涯，，，，有用期为12个月。。生产日期及失效日期见标签。。
拆封后未用完的微孔板应放入密封袋内2℃～8℃生涯。。液体组份应拧紧瓶盖2℃～8℃生涯。。各组份拆封后应在一个月内用完。。
【适用仪器】
具有450nm波长的酶标仪
【样本要求】
接纳无菌抗凝静脉血。。全血样本若不可连忙检测，，，，可4℃存放一周，，，，或-20℃存放一个月，，，，或-70℃存放3年。。本试验可用于含EDTA、柠檬酸钠、肝素钠、草酸钠、双草酸盐抗凝剂样本的检测，，，，但含其它种类抗凝剂的样本能否用于本试验尚无实验数据。。染菌标本请勿使用；；溶血状态对实验效果无影响；；对严重血虚患者的样本应先将样本中血浆与红细胞比例调解至1:1后，，，，再按要求举行稀释。。
【磨练要领】
1.  试验历程注重事项
1.1  试剂盒各组份从冷藏情形中取出时，，，，应在室温（20℃～25℃）平衡至无潮气方可使用。。拆封后未用完的微孔条应放入密封袋内生涯。。
1.2  在贮存及温育历程中，，，，应阻止强光直接照射。。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染。。
1.3  为阻止试剂或样品的微生物污染及交织污染，，，，应使用一次性吸嘴，，，，不要重复使用。。
1.4  在取用比照品和酶标记物之前应轻轻摇动使其充分混匀，，，，加样前，，，，使用微孔振荡器充分混匀稀释过的样品。。
1.5  严酷遵守划定的温育时间和温度。。若是第一孔与最后一孔加样时间距离太长，，，，将会导致差别的“预温育”时间，，，，从而影响丈量值的准确性及重复性。。
1.6  洗涤竣事时，，，，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻小扣打，，，，确保所有孔内均无残留洗涤液，，，，阻止爆发泡沫。。若是使用自动洗板机，，，，应注重准确操作。。
2.  试验准备
2.1  试剂盒反映试剂准备
2.1.1  微孔条
将检测所需数目的微孔条牢靠于板架上，，，，剩余的微孔条放入密封袋中生涯。。
2.1.2  洗涤液
在清洁的量筒内稀释浓缩洗涤液。。50mL浓缩洗涤液加入蒸馏水或去离子水至500mL，，，，混匀。。
2.1.3  其它液体组份
直接使用，，，，使用前应轻轻摇动使其充分混匀。。
2.2  样品准备
取充分混匀的待检全血样品、阳性比照、阴性比照各25l划分加入至200μL样品裂解液中，，，，在旋涡振荡器上强烈振荡60秒使红细胞完全裂解。。
3.  检测历程
3.1  每次实验每板须设空缺孔（若以双波长检测不设空缺孔）、阳性比照、阴性比照各1孔，，，，临界比照3孔。？？杖笨撞患友泛兔副昙俏，，，，只加洗液、显色液A、显色液B和终止液；；临界比照直接使用，，，，100l/孔。。其余每孔加入裂解后样品100l。。加封板膜置37℃±1℃温育60分钟。。
3.2  甩净孔中液体，，，，将洗液注满每孔（约300μL/孔）后，，，，每次停留60秒后甩净拍干，，，，重复3次。。除空缺孔外每孔加酶标记物100l（2滴），，，，加封板膜置37℃±1℃温育60分钟。。
3.3  甩净孔中液体，，，，同上洗板3次，，，，拍干后各孔加显色液A、显色液B各50μL，，，，置37℃避光15分钟，，，，每孔加入终止液50μL，，，，稍微震荡微孔板以混淆匀称。。
3.4  单波长检测：以空缺孔调零，，，，用酶标仪读取450nm处的A值；；
双波长检测：用酶标仪读取450nm和630nm处的A值，，，，以A450nm－A630nm盘算A值。。
4.  参考规模
阴性比照A值≤0.15；；0.20≤临界比照A值平均值≤0.80，，，，临界比照A值平均值／阴性比照A值平均值≥2.0，，，，阳性比照A值＞临界比照A值平均值，，，，证实实验建设。。否则试验效果无效，，，，需重新试验。。
5.  效果判断
盘算S/CO值，，，，S/CO=样品A值／临界比照A值平均值。。
反映性（R）：S/CO≥1.15
可疑（S）：0.85＜S/CO＜1.15
阴性（N）：S/CO≤0.85
【磨练效果的诠释】
效果为反映性提醒为东南亚缺失型α-地中海血虚基因携带者。。对可疑效果样品应复试，，，，如复试效果仍然为可疑，，，，则应做基因诊断确认。。
【磨练要领的局限性】
1.  样品或试剂被微生物污染以及试剂的交织污染可能导致过失效果。。
2.  本试剂盒不适用于0.5岁以下人群东南亚缺失型α-地中海血虚筛查，，，，不适用于Zeta链卵白定量检测。。
3.  本品应由专业职员使用，，，，效果仅供临床参考，，，，临床医生应连系病史周全思量和诊断。。
【产品性能指标】
1.  迅速度、特异性
通过1034例临床研究，，，，与基因诊断要领较量，，，，迅速度为100％，，，，特异性为100％。。
2.  细密性
批内变异系数CV（%）不高于15%（n＝10）。。
3.  交织反映
未发明本品与beta地贫基因携带者的血有交织反映。。与其他类型地贫基因携带者的交织反映尚无实验数据。。
4.  滋扰试验
4.1  与样品接触的抗凝剂（EDTA、柠檬酸钠、肝素钠、草酸钠、双草酸盐）对本品检测效果无显著滋扰。。
4.2  一定浓度规模的内源性物质（胆红素0.1~0.4 mg/mL、血红卵白5~50 mg/mL、甘油三酯2~8 mg/mL）对本品检测效果无显著滋扰。。
【注重事项】
1.  本品仅用于体外诊断，，，，一次性使用。。
2.  用于制备本品阴性比照、阳性比照的血液已经HBsAg、HCV抗体、梅毒螺旋体抗体和HIV抗体检测为阴性，，，，试剂盒内其它种种组份均无生物熏染性。。由于不可包管检测各组份所有的熏染性因素，，，，因此本品应作为具有潜在的熏染性子料看待，，，，所有接触试剂盒的职员应按实验室规范要求举行操作。。
3.  任何临床样品都应作为具有熏染性样品看待。。
4.  待检样品及其他潜在熏染质料试验后应予以消毒。。
5.  注重阻止皮肤或黏膜直接接触试剂或样品。。显色液中含TMB，，，，终止液含硫酸。。含TMB的试剂在试验中会诱发其它反映；；含硫酸的试剂有侵蚀性。。一旦接触到这些液体，，，，应连忙用水彻底洗濯。。
【标识的诠释】
包装标签
的标识    
标识的寄义 温度限制 体外诊断医疗器械 参考使用说明 不得二次使用
【参考文献】
[1]Chui DH，，，，Wong SC，，，，Chung SW,Embryonic Zeta-globin chains in adults: a marker for alpha-thalassemia-1 haplotype due to a greater than 17.5-kb deletion. N Engl J Med. 1986 Jan 9;314(2):76-9
[2]Lebo RV，，，，Saiki RK，，，，Swanson K et al.Prenatal diagnosis of alpha-thalassemia by polymerase chain reaction and dual restriction enzyme analysis. Hum Genet. 1990
Aug;85(3):293-9.
[3]Kutlar F，，，，Moscoso H，，，，Kiefer CR et al. Quantities of adult，，，，fetal and embryonic globin chains in the blood of eighteen- to twenty-week-old human fetuses. J Chromatogr. 1991 Jul 5;567(2):359-68.
【基本信息】
注册人/生产企业名称：珠海经济特区海泰生物制药有限公司
住所：珠海市唐家湾镇港湾大道立异四路18号     
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生产地点：珠海市唐家湾镇港湾大道立异四路18号    
生产允许证编号： 
【医疗器械注册证编号/产品手艺要求编号】
【说明书批准日期及修他日期】